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中药多糖的提取、分离纯化及分析方法的进展
点击次数: 发布时间:2014-08-18
1   中药多糖的提取
1.1  传统提取方法
  中药多糖常规的提取方法多采用热水、酸、碱、乙醇等溶剂进行浸提,如水提醇沉法、酸碱提取法、索氏提取法等作为经典的传统提取工艺,在中草药有效成分的提取过程中应用广泛。
2  中药多糖的分离
2.1  除蛋白质
2.1.1  Sevag法
  利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性的特点,将提取液与Sevag试剂(氯仿:戊醇或正丁醇以4:1或5:1比例混合)按一定比例混合,通过离心除去介于提取液与Sevag试剂交界处的变性蛋白质。夏泉等利用Sevag法除去黄芪粗多糖中的蛋白质成分,经6次处理后,黄芪粗多糖冻干粉中的蛋白质含量下降70.8%,而多糖的含量仅下降4.44%。
3.1.3  金属络合物法
  作为沉淀剂沉淀法中的一种,其基本原理是溶度积规律,根据多糖能与铜、钡、钙、铅离子形成难溶性的络合物沉淀,从溶液中沉淀析出的方法。得到的络合物沉淀用5%无机酸乙醇溶液或硫化氢分解。
3.1.4  盐析法
  根据不同多糖在不同盐浓度中溶解度不同,在中药水提溶液加无机盐(常用的盐析剂有硫酸铵、氯化钠、氯化钾等,以硫酸铵最佳)至一定浓度或达到饱和时,可使有些物质溶解度降低,甚至沉淀析出,达到与水溶性杂质分离的目的。

  亲和层析(AE)是根据生物大分子与某些对应的专一分子特异性的、可逆性的亲和结合作用而建立的一种层析技术。
  江咏等通过静态吸附的方法对巴戟天粗多糖在Con A Sephorose 4B亲和填料上的吸附和脱附情况进行研究,确定其最佳吸附条件为:pH7.5,NaCl浓度0.1 mol/L;最佳脱附条件为:pH6.5,α-D-甲基葡萄糖苷浓度0.02 mol/L。在此条件下,巴戟天粗多糖被分离为MOP-A1和MOP-A2两个组分,占进样总糖量的44.8%。


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